Mabiotech : APPLICATION KITS - Kit de cIEF - Focalisation iso-électrique - BECKMAN COULTER

APPLICATION KITS - Kit de cIEF - Focalisation iso-électrique - BECKMAN COULTER

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Kit de cIEF - Focalisation iso-électrique - BECKMAN COULTER

 

Séparation à haute résolution et reproductible des protéines selon les différences de charge

La focalisation iso-électrique dans les capillaires est une alternative rapide et simple à la méthode traditionnelle de la focalisation iso-électrique des gels dans la caractérisation des protéines. L'avantage de la méthode de l'électrophorèse capillaire est, d'une part, la possibilité d'automatiser simplement et, d'autre part, la détection directe des protéines.

On obtient des reproductibilités avec écart-type relatif inférieur à 0,1% lors de la détermination des valeurs pI et avec écart-type relatif inférieur à 0,3% sur les temps de migration.
L'industrie pharmaceutique utilise cette méthode pour comparer les différents lots de production, en visualisant des différences infimes en glycolysation ou en désamidification.
Les nouveaux marqueurs pI à base de peptides donnent des bandes étroites et permettent de déterminer exactement les valeurs pl des protéines inconnues.


Avantages de la méthode

  • Simple à automatiser (kits validés)
  • Il n’est pas nécessaire de colorer les protéines
  • Reproductibilité inférieure à 0,1% pour la détermination de l’iodure de propidium (PI)
  • Reproductibiité à écart-type inférieur à 0,3% pour la migration
  • Détermination exacte de protéines inconnues par le biais de nouveaux marqueurs pI

 

Technologie

  • La mobilisation s’effectue chimiquement en remplaçant le catholyte
  • L’optimisation des opérations s’effectue en ajoutant de l’urée à une concentration allant jusqu’à 6 M
  • Gradients de pI très stables et temps de migration reproductibles grâce à des stabilisateurs cathodiques et anodiques
  • Suppression de la moindre précipitation pour une séparation optimale
  • Les nouveaux marqueurs pI (peptides courts présentant seulement quelques acides aminés dans la séquence) permettent des pics fins pour un meilleur calibrage du système

 

Eléments constitutifs du kit de cIEF : (A80976)


Kit de cIEF :
- Marqueurs pl
- 1 capillaire neutre
- cIEF-gel
Diverses instructions de travail détaillées sont fournies pour une plage de pI de 3 à 10 et pour les anticorps monoclonaux